1、干熱滅菌。
食用菌栽培由于一般玻璃用具,培養(yǎng)皿、吸管等將滅菌材料。用報(bào)紙包好后,放入烘箱中。使溫度逐漸升至150―160℃保持2小時(shí)后,關(guān)閉電源。使緩慢冷卻。(降溫太快時(shí)玻璃易碎)即滅菌完畢。
2、濕熱滅菌。
①、常壓法 常壓滅菌是用蒸汽鍋(或普通鍋)蒸的方法。溫度達(dá)到100℃起一般需要4―6小時(shí),溫度不超過100℃時(shí),根據(jù)滅菌量的多少,一般保持在8―24小時(shí)。即可達(dá)到無菌效果。在沒在高壓滅菌設(shè)備或在高溫滅菌易破壞的培養(yǎng)基情況下多采用此法。另常壓滅菌還有間歇滅菌法。 此法比較麻煩,通常必須進(jìn)行三次。每次一小時(shí),因?yàn)榈谝淮握艉?,其中營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞被殺死,而其芽胞還保持著活力,所以蒸后,將培養(yǎng)基放入溫箱中24小時(shí),待其芽胞萌發(fā)后,再蒸第二樣再經(jīng)24小時(shí),蒸第三次,這樣才能滅菌徹底。
?、?、高壓法 此法乃是利用高壓蒸汽殺菌鍋進(jìn)行滅菌,當(dāng)用蒸汽滅菌時(shí),如鍋內(nèi)增加壓力,則溫度亦隨之增高,例如壓力0.56公斤/厘米2=0.55帕斯卡。溫度為112.6℃;如壓力1公斤/厘米2=0.98帕斯卡。溫度可達(dá)120―121℃。通常理想滅菌干120℃,20分鐘能達(dá)到目地。115℃、30分鐘也就可以了。使用高壓殺菌鍋時(shí)要分別注意兩點(diǎn)。1、增壓前必須把鍋內(nèi)冷空氣排盡,否則壓力雖然升高,而其溫度達(dá)不到要求。2、滅菌完畢后,應(yīng)使鍋內(nèi)壓力徐徐下降,不然,容皿中液體會(huì)噴出。棉塞也易脫落,致使前功盡棄,在無烘箱時(shí),其它器皿也可用溫?zé)釡缇瑴缇皯?yīng)該用紙包好。
3、火焰滅菌。
對(duì)于接種針或其它金屬用具的滅菌,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱,此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采取通過火焰而達(dá)到滅菌的目地。
4、藥物滅菌。
①、70%酒精,用于冷卻燒紅后的接種針,操作前手或用具的表面殺菌,載玻片,蓋玻片的浸泡等。 ②、新潔爾滅、 市售一般為5%溶液,用時(shí)稀釋至萬(wàn)分之一到千分之一,用于工作環(huán)境和器皿表面的滅菌。③、 0.1%升汞液:用于材料表面的殺菌,用具或廢棄的培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)后的處理。④、福爾馬林(40%由醛溶液):用于空間的熏蒸滅菌,加熱或加高錳酸鉀使放盡甲醛氣體,注意將空間密閉并維持24小時(shí)
5、紫外線滅菌,用于接種室等的空氣滅菌。